导语：欢迎来到发财五毛。今天给大家带来棚室葡萄脱毒苗的培育。
葡萄病毒病是影响葡萄产量和品质的一类重要病害，因此在建葡萄园时，应尽量选择脱毒苗栽植。关于葡萄苗木的脱毒方法，简要介绍以下两种供参考。
一.脱毒苗繁育体系：
1.建立无病毒母本园：包括品种采穗圃、无性系砧木压条繁育圃和砧木采种园。母本园应远离同一树种2km以上，最好栽植在有防虫网设备的网室内以防媒介昆虫带毒传染。应建立母本树档案，定期进行病毒检测。
2.完善繁育手续：繁殖无病毒苗木的单位或个人必须填写申报表，经省级主管部门核准认定并颁发无病毒苗木生产许可证后方可进行繁殖。使用的种子、无性系贴木繁殖材料和接穗，必须采自无病毒母本园，附有无病毒母本园合格证。育成的苗木须经植物检疫机构检验，合格后签发无病毒苗木产地检疫合格证，并发给无病毒苗木标签，方可按无病毒苗木出售。
3.规范繁育技术：繁殖无病毒苗木的苗圃地，要选择地势平坦、土壤疏松、有灌溉条件的地块，同时也应远离同一树种2km以上，以便远离病毒寄主植物。苗木的嫁接必须在专业技术人员的监督指导下进行，嫁接工具要专管专用。
二.脱毒苗培育方法：
1.热处理脱毒：热处理一般选择生长旺盛、有发达根系的盆栽苗木，经越冬后置于热处理箱内进行处理，箱内温度和湿度能自控，将热处理箱放置温室中，利用温室的阳光，使进行热处理的葡萄植株能正常生活。在38℃±1℃的温度条件下，处理2~3个月后，剪取长0.5-1mm或更短的材料进行组织培养，便可获得无病毒苗木。各种病毒脱毒的温度和时间长短有一定差异。近年来，为了减轻热处理对苗木的损伤，将恒温处理改成变温(35-40℃)处理，也可以脱除某些病毒。如白天39-40℃,夜间35-36℃,经3个月可脱除无味果病毒。
2.茎尖培养脱毒：采用生物技术即茎尖培养方法，可脱除某些病毒。实践证明，单用热处理和茎尖培养，均难以脱除卷叶病、茎痘病和栓皮病等病毒。如果将两种方法结合应用，则可提高脱毒效果，获得较可靠的无毒苗。植株经过热处理后，切下2-3cm长的葡萄顶芽和侧芽，剪去叶片，经无菌化处理后，取0.5mm茎尖接种于盛有分化培养基的试管或三角瓶中，每管(瓶)接种1个茎尖，在24-29℃,00k光照下培养，6周后进行转接，取5mm长的幼芽在mL的三角瓶中继代培养成苗。经过继代和生根培养基培养，6个月后即得大量试管苗。
3.病毒检测：经过热处理结合茎尖培养获得的组培苗要经过病毒检测，证明萄苗的培方法脱毒后才能按无毒苗繁殖使用。检测病毒现采用以下两种：
（1）指示植物检测法：使用的木本指示植物有沙地葡萄、圣乔治、品丽珠、赤霞珠、LN-33、蜜笋、河岸葡萄、马塔洛、Richter10,Kober、巴柯22-A、黑品诺、佳美、皇帝、佳利酿等。这些指示植物能检测全球发生的各种重要病毒和不同的株系。绿枝嫁接是目前常采用的方法，一般在温室进行。在露地，需要的时间则较长。经过两个生长季节的重复检测后才能确定为无病毒植株。一些需要很长时间才表现症状的病害，如茎痘病、栓皮病，露地嫁接观察也是必要的。
(2)酶联免疫吸附检测法：酶联免疫吸附简称ELSA,是利用血清技术快速检测病毒的一种方法。该法灵敏、快速，且不需很复杂的设备条件就能做大量检测，是目前世界各国普遍采用的种方法。酶联法有两种，即直接酶联法和间接酶联法，前者提出较早，是抗体和抗原直接结合，最后通过微型板呈现黄色反应而确定是否带毒；后来演变为间接酶联，抗体和抗原不直接结合，而是间接的。
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