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解决食品和疫苗的过敏问题日本团队敲除鸡

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鸡蛋是大多数人类饮食的重要组成部分,是蛋白质、维生素和矿物质的主要来源之一。然而,鸡蛋过敏阻碍了一部分人从中摄取营养。据估计,1-2%的儿童对鸡蛋过敏。

近日,日本广岛大学的研究人员提出了一种去除鸡蛋中致敏成分的解决方案,以便所有人都可安全地食用。

该研究以“Transcriptionactivator-likeeffectornuclease-mediateddeletionsafelyeliminatesthemajoreggallergenovomucoidinchickens”为题发表于

FoodandChemicalToxicology

。该实验通过基因组编辑来敲除

卵类黏蛋白

(Ovomucoid,OVM),OVM是过敏背后的罪魁祸首。

OVM占蛋清总蛋白的11%,在保护鸡蛋中胚胎免受有害微生物侵害方面发挥作用。在主要的鸡蛋过敏原中,OVM对热和消化酶非常稳定,因此很难通过理化方式将其去除或灭活。

“敲除OVM的鸡蛋之所以能够作为食物,重要的是要评估其作为食品的安全性。在这项研究中,我们用转录激活子样效应因子核酸酶(TranscriptionActivator-LikeEffectorNucleases,TALENs)敲除了鸡的OVM,并检查了是否存在突变蛋白表达、载体序列插入和脱靶效应。”日本广岛大学副教授RyoEzako说。

为了检测和分离OVM,研究人员设计了靶向外显子1的TALENs。外显子1是基因的重要区域,包含蛋白质翻译和基因调控的信息。然后测试产生的鸡蛋是否缺乏OVM,是否产生突变蛋白、脱靶效应。

(来源:pixabay)

研究小组观察到,这些鸡蛋表现出

移码突变

,即DNA分子由于某位点碱基的缺失或插入,引起阅读框架变化,造成下游的一系列密码子的移位,使原来编码某种肽链的基因变成编码另一种完全不同的肽链序列。

不过,本研究针对OVM的外显子1设计了基因组编辑靶标。因此,移码突变可能导致信号肽产生无OVM的鸡,并且不会在鸡蛋中积累副产物。

最后,研究人员通过抗OVM和抗突变OVM抗体的测试,证实了经基因编辑的鸡蛋不存在任何过敏原蛋白的痕迹,因此确认鸡蛋是“安全的”。

“纯合OVM敲除的母鸡产下的鸡蛋没有明显的异常。免疫印迹显示蛋白中既不含成熟OVM也不含OVM截短的变异株。”Ezaki说。

全基因组测序(WGS)显示,OVM敲除的鸡中潜在的TALEN诱导的脱靶效应,位于基因间和内含子区域。WGS还证实了用于基因组编辑的质粒载体仅短暂存在,不会整合到鸡的基因组中。

“这些安全性评估表明OVM敲除鸡产下的鸡蛋解决了食品和疫苗中的过敏问题。”

这项研究得到了日本科学促进会KAKENHI的支持,并将继续验证无过敏鸡蛋的安全性。鉴于OVM微量存在即可引发过敏反应,虽然目前确定OVM敲除鸡蛋的过敏性低于标准鸡蛋,并且可以安全地用于热加工食品,而不会引发过敏,但该团队将进一步分析其物理特性和加工适用性,并通过临床试验确认功效。

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